用途?
Taq酶主要用于对保真性要求不高的PCR扩增和荧光定量PCR，为方便用户对镁离子浓度的调整，所有的buffer都是不含镁离子的，镁离子单独包装。?
Taq酶特征?
???克隆有?Thermu?aquaticus?DNA?Polymerase?基因的大肠杆菌经诱导表达后，再经三次过柱纯化分离出来的一个约?94?KD?的重组蛋白。?
???具有?5?到?3‘合成?DNA?的能力；无3?到?5‘外切酶的活性。?
???具有?5??到?3?‘外切酶的活性，?特别适合用于荧光定量PCR?。?
???具有?3‘端加?A?的功能，产物经纯化后可直接用于T－A克隆。?
???无外源核酸酶和细菌?DNA?污染。?
???SDS?－?PAGE?检测，纯度＞?95%?。?
???**佳延伸温度?72?℃?，**佳?Mg?2+?浓度?1.5mM?，**佳?dNTPS?浓度?0.2mM?,?延伸速度为?2000base/min?。?
???10?×?PCR?buffer:?500mM?KCl,?100mM?Tris-HCl?(pH?9.0?，?25℃?),?1%?TritonX-100?和?15mM?MgCl2?。?
???Storage?buffer:?20mM?Tris-HCl?(pH?8.0),?100mM?KCl,?0.1mM?EDTA,?1mM?DTT,?50%甘油，?0.5%?Nonidet?-P40?和?0.5%?Tween20?。?
Taq酶单位定义?
在?74℃?条件下，?30?分钟内催化?10nmol?dNTP?的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为：?50mM?Tris-HCl?(pH?9.0?，?25℃?),?50mM?NaCl,?5mM?MgCl2,?200mM?dNTP(?含未标记和标记?[3H]?dTTP?),?10mg?活化的小牛胸腺?DNA?和?0.1mg/ml?BSA,?终反应体积为?50ml?
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